Αμιδάση (AMD)
Ένζυμα:Είναι μακρομοριακοί βιολογικοί καταλύτες, τα περισσότερα ένζυμα είναι πρωτεΐνες
Αμιδάση:Καταλύουν την υδρόλυση διαφόρων ενδογενών και ξένων αλειφατικών και αρωματικών αμιδίων μεταφέροντας μια ακυλομάδα στο νερό με την παραγωγή ελεύθερων οξέων και αμμωνίας. Τα υδροξαμικά οξέα και άλλα οργανικά οξέα χρησιμοποιούνται ευρέως ως φάρμακα επειδή αποτελούν συστατικά αυξητικών παραγόντων, αντιβιοτικών και αναστολέων όγκων. Οι αμιδάσες μπορούν να χωριστούν σε ακυλάσες τύπου R και S ανάλογα με τη στερεοεκλεκτικότητα του καταλύτη.
Εκτός από την κατάλυση της υδρόλυσης των αμιδίων, η αμιδάση μπορεί επίσης να καταλύσει αντιδράσεις μεταφοράς ακυλίου παρουσία συν-υποστρωμάτων όπως η υδροξυλαμίνη.
Οι αμιδάσες με διαφορετικές πηγές έχουν διαφορετική εξειδίκευση υποστρώματος, μερικές από αυτές μπορούν να υδρολύσουν μόνο αρωματικά αμίδια, μερικές από αυτές μπορούν να υδρολύσουν μόνο αλειφατικά αμίδια και μερικές υδρολύουν α- ή ω-αμινοαμίδια. Οι περισσότερες αμίνες έχουν καλή καταλυτική δράση μόνο για ακυκλικά ή απλά αρωματικά αμίδια, αλλά για τα σύνθετα αρωματικά, τα ετεροκυκλικά αμίδια, ειδικά τα αμίδια με ορθο-υποκαταστάτες, έχουν γενικά χαμηλή δραστικότητα (μόνο λίγα ένζυμα εμφανίζουν καλύτερες καταλυτικές επιδράσεις).
Καταλυτικός μηχανισμός:
| Ένζυμα | Κωδικός προϊόντος | Κωδικός προϊόντος |
| Σκόνη ενζύμου | ES-AMD-101~ ES-AMD-119 | ένα σετ 19 αμιδασών, των 50 mg η καθεμία 19 τεμάχια * 50mg / τεμάχιο ή άλλη ποσότητα |
| Κιτ διαλογής (SynKit) | ES-AMD-1900 | ένα σετ 19 αμιδασών, 1 mg η καθεμία 19 τεμάχια * 1mg / τεμάχιο |
★ Υψηλή εξειδίκευση υποστρώματος.
★ Ισχυρή χειραλική επιλεκτικότητα.
★ Υψηλή απόδοση μετατροπής.
★ Λιγότερα υποπροϊόντα.
★ Συνθήκες ήπιας αντίδρασης.
★ Φιλικό προς το περιβάλλον.
➢ Ο ενζυμικός έλεγχος θα πρέπει να διεξάγεται για συγκεκριμένα υποστρώματα λόγω της εξειδίκευσής τους και να λαμβάνεται ένα ένζυμο που καταλύει το υπόστρωμα-στόχο με την καλύτερη καταλυτική δράση.
➢ Μην έρχεστε ποτέ σε επαφή με ακραίες συνθήκες όπως: υψηλή θερμοκρασία, υψηλό/χαμηλό pH και οργανικούς διαλύτες με υψηλή συγκέντρωση.
➢ Κανονικά, το σύστημα αντίδρασης θα πρέπει να περιλαμβάνει υπόστρωμα, ρυθμιστικό διάλυμα (το βέλτιστο pH αντίδρασης του ενζύμου). Συν-υποστρώματα όπως η υδροξυλαμίνη θα πρέπει να υπάρχουν στο σύστημα αντίδρασης μεταφοράς ακυλίου.
➢ Η AMD θα πρέπει να προστίθεται τελευταία στο σύστημα αντίδρασης με βέλτιστο pH και θερμοκρασία αντίδρασης.
➢ Όλα τα είδη AMD έχουν διάφορες βέλτιστες συνθήκες αντίδρασης, επομένως το καθένα από αυτά θα πρέπει να μελετηθεί περαιτέρω ξεχωριστά.
Παράδειγμα 1(1):
Δραστηριότητα υδρόλυσης σε διαφορετικά υποστρώματα αμιδίου
| Υπόστρωμα | Συγκεκριμένη δραστηριότητα μmol min-1mg-1 | Υπόστρωμα | Συγκεκριμένη δραστηριότητα μmol min-1mg-1 |
| Ακεταμίδιο | 3.8 | ο-OH βενζαμίδιο | 1.4 |
| Προπιοναμίδιο | 3.9 | p-OH βενζαμίδιο | 1.2 |
| Λακταμίδη | 12.8 | ο-Νιου Χάμσαϊρ2βενζαμίδιο | 1.0 |
| Βουτυραμίδη | 11.9 | p-Νιου Χάμσαϊρ2βενζαμίδιο | 0,8 |
| Ισοβουτυραμίδη | 26.2 | ο-Τολουαμίδη | 0,3 |
| Πενταναμίδη | 22,0 | p-Τολουαμίδη | 8.1 |
| Εξαναμίδιο | 6.4 | Νικοτιναμίδιο | 1.7 |
| Κυκλοεξαναμίδη | 19,5 | Ισονικοτιναμίδιο | 1.8 |
| Ακρυλαμίδιο | 10.2 | Πικολιναμίδη | 2.1 |
| Μετακρυλαμίδιο | 3.5 | 3-φαινυλοπροπιοναμίδιο | 7.6 |
| Προλιναμίδη | 3.4 | Ινδολ-3-ακεταμίδιο | 1.9 |
| Βενζαμίδη | 6.8 |
Η αντίδραση πραγματοποιήθηκε σε ρυθμιστικό διάλυμα φωσφορικού νατρίου 50mM, pH 7,5, στους 70 ℃.
| Αμίδια | Υδροξυλαμίνη | Υδραζίνη |
| Ακεταμίδιο | 8.4 | 1.4 |
| Προπιοναμίδιο | 18.4 | 3.0 |
| Ισοβουτυραμίδη | 25,0 | 22.7 |
| Βενζαμίδη | 9.2 | 6.1 |
Η αντίδραση πραγματοποιήθηκε σε ρυθμιστικό διάλυμα φωσφορικού νατρίου 50mM, pH 7,5, στους 70 ℃.
Σχετική συγκέντρωση αντιδραστηρίου: αμίδια, 100 mM (βενζαμίδιο, 10 mM). υδροξυλαμίνη και υδραζίνη, 400 mM. ένζυμο 0,9 μM.
Παράδειγμα 2(2):
Παράδειγμα 3(3):
1. D'Abusco AS, Ammendola S., et al. Extremophiles, 2001, 5:183-192.
2. Guo FM, Wu JP, Yang LR, κ.ά. Process Biochemistry, 2015, 50(8): 1400-1404.
3. Zheng RC, Jin JQ, Wu ZM, κ.ά. Βιοοργανική Χημεία, 2017, Διαθέσιμο στο διαδίκτυο 7.
